Efeito do tipo de fixador e tempo de fixação na morfologia de folículos pré-antrais equinos

Autores

  • Isabela Búfalo Universidade Estadual de Londrina
  • Suellen Miguez González Universidade Estadual de Londrina
  • Camila Bizarro Silva Universidade Estadual de Londrina
  • Andressa Guidugli Lindquist Universidade Estadual de Londrina
  • Larissa Zamparone Bergamo Universidade Estadual de Londrina
  • Camila Bortoliero Costa Universidade Estadual de Londrina
  • Luciana Simões Rafagnin Marinho Universidade Estadual de Londrina
  • Marcelo Marcondes Seneda Universidade Estadual de Londrina

DOI:

https://doi.org/10.5433/1679-0359.2016v37n1p243

Palavras-chave:

Bouin, Carnoy, Eqüinos, Folículos pré-antrais, Formol 10%, Ovário.

Resumo

O objetivo deste estudo foi investigar a eficácia dos fixadores teciduais Bouin, Carnoy ou Formol 10% em fragmentos ovarianos equinos. Ovários (n=4) de éguas, sem raça definida, foram obtidos de abatedouro local e transportados em recipiente térmico a 20 ºC. Imediatamente após a coleta, os ovários foram lavados com solução de PBS modificado (Cultilab®, Campinas-SP, Brasil), e divididos em nove fragmentos com aproximadamente 5x5x1 mm, retirados do parênquima de cada ovário. Em seguida, os fragmentos ovarianos foram imersos em um dos três diferentes fixadores, Bouin (B), Carnoy (C) ou Formol 10% (F), por 6, 12 ou 24 horas. Cada fragmento foi acondicionado individualmente em um frasco contendo aproximadamente 20 vezes o volume da solução fixadora. Após este período, foram mantidos em álcool 70% por 24 horas. Para cada fixador e tempo foram realizadas quatro réplicas. No processamento histológico, os fragmentos foram desidratados em concentrações crescentes de álcool, diafanizados em xilol e incluídos em parafina. Em seguida, foram feitos cortes seriados de 5 ?m em micrótomo rotativo (Leica®, Wetzlar-Alemanha), seguidos da montagem de lâminas e coloração com ácido periódico de Schiff (PAS) e hematoxilina. Foram avaliadas 540 lâminas com 1.620 cortes histológicos, contendo 465 folículos pré-antrais que foram classificados como íntegros ou degenerados. A degeneração foi detectada pela presença de pelo menos um dos seguintes aspectos: retração do citoplasma, núcleo picnótico, vacúolos citoplasmáticos, deslocamento das células da granulosa e/ou rompimento da membrana basal. Um teste de regressão logística foi utilizado para a análise estatística, e as diferenças foram consideradas significativas quando P<0,05. O fixador Carnoy utilizado por 24 horas proporcionou as melhores condições de integridade morfológica (53,3%; 32/60) em relação aos demais, sendo Boiun por 24 h o tratamento menos eficaz (19,1%; 9/47). Os demais tratamentos apresentaram os resultados a seguir: C12h 50% (30/60), C6h 40% (24/60), F24h 37,8% (17/45), F12h 35,1% (13/37), F6h 32% (16/50), B12h 30,5% (18/59) e B6h 24,4% (11/45). Portanto, sugerimos que a fixação de tecido ovariano equino com Carnoy por 24 horas é o mais indicado para preservação morfológica de folículos pré-antrais.

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Biografia do Autor

Isabela Búfalo, Universidade Estadual de Londrina

Discente do Curso de Graduação em Medicina veterinária, Universidade Estadual de Londrina, UEL, Londrina, PR, Brasil.

Suellen Miguez González, Universidade Estadual de Londrina

Discente do Curso de Mestrado do Programa de Pós-Graduação em Ciência Animal, UEL, Londrina, PR, Brasil.

Camila Bizarro Silva, Universidade Estadual de Londrina

Discente do Curso de Doutorado do Programa de Pós-Graduação em Ciência Animal, UEL, Londrina, PR, Brasil.

Andressa Guidugli Lindquist, Universidade Estadual de Londrina

Discente do Curso de Graduação em Medicina veterinária, Universidade Estadual de Londrina, UEL, Londrina, PR, Brasil.

Larissa Zamparone Bergamo, Universidade Estadual de Londrina

Discente do Curso de Mestrado do Programa de Pós-Graduação em Ciência Animal, UEL, Londrina, PR, Brasil.

Camila Bortoliero Costa, Universidade Estadual de Londrina

Discente do Curso de Mestrado do Programa de Pós-Graduação em Ciência Animal, UEL, Londrina, PR, Brasil.

Luciana Simões Rafagnin Marinho, Universidade Estadual de Londrina

Pós-Drª, UEL, Londrina, PR, Brasil.

Marcelo Marcondes Seneda, Universidade Estadual de Londrina

Prof. Dr., Deptº de Clínicas Veterinárias, Laboratório de Reprodução Animal, Centro de Ciências Agrárias, UEL, Londrina, PR, Brasil.

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Publicado

2016-02-29

Como Citar

Búfalo, I., González, S. M., Silva, C. B., Lindquist, A. G., Bergamo, L. Z., Costa, C. B., Marinho, L. S. R., & Seneda, M. M. (2016). Efeito do tipo de fixador e tempo de fixação na morfologia de folículos pré-antrais equinos. Semina: Ciências Agrárias, 37(1), 243–250. https://doi.org/10.5433/1679-0359.2016v37n1p243

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