Copro-PCR do gene B1 para diagnóstico de Toxoplasma gondii em fezes de gatos domésticos
DOI:
https://doi.org/10.5433/1679-0359.2024v45n1p87Palavras-chave:
Copro-PCR, Oocistos, Toxoplasmose animal.Resumo
Toxoplasma gondii é um parasita intracelular obrigatório que possui um ciclo de vida heteroxênico, tendo como hospedeiro definitivo os felinos, fato que culmina na manutenção do ciclo de vida parasitário. O objetivo deste estudo foi determinar a prevalência de Toxoplasma gondii em fezes de gatos por meio da Copro-PCR, bem como avaliar a frequência de positividade entre gatos errantes e domiciliados, machos e fêmeas e castrados e não castrados. Para tal, foram coletadas 120 amostras fecais de gatos que, posteriormente, foram submetidas à sedimentação espontânea. Após 24 horas extraiu-se o DNA das amostras com um kit comercial, com adaptações. Após a extração, realizou-se a PCR com os primers que amplificam o gene B1, seguida da eletroforese em gel de poliacrilamida a 6%. Foi possível obter uma prevalência para T. gondii de 14,1% (17/120) na Copro-PCR ao passo que o Exame Parasitológico de Fezes não detectou nenhuma amostra positiva. Além disso, os gatos errantes obtiveram maior frequência de positividade quando comparado aos domiciliados. Não houve diferença significativa em relação ao sexo e aos animais castrados ou não castrados. Foi possível concluir que a copro-PCR do Gene B1 utilizada na detecção de T. gondii possui uma alta sensibilidade, detectando até mesmo amostras negativas no Exame Parasitológico de Fezes e que os gatos errantes possuem maior probabilidade de se infectarem com T. gondii do que os domiciliados.
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Referências
Afonso, E., Thulliez P., & Gilot-Fromont, E. (2010). Local meteorological conditions, dynamics of seroconversion to Toxoplasma gondii in cats (Felis catus) and oocyst burden in a rural environment. Epidemiology & Infection, 138(8), 1105-1113. doi: 10.1017/S0950268809991270 DOI: https://doi.org/10.1017/S0950268809991270
Aguirre, A. A., Longcore, T., Barbieri, M., Dabritz, H., Hill, D., Klein, P. N., Lepczyk, C., Lilly, E. L., McLeod, R., Milcarsky, J., Murphy, C. E., Su, C., VanWormer, E., Yolken, R., & Sizemore, G. C. (2019). The one health approach to toxoplasmosis: epidemiology, control, and prevention strategies. EcoHealth, 16(2), 378-390. doi: 10.1007/s10393-019-01405-7 DOI: https://doi.org/10.1007/s10393-019-01405-7
Almeria, S., & Dubey, J. P. (2021). Foodborne transmission of Toxoplasma gondii infection in the last decade: an overview. Research in Veterinary Science, 135, 371-385. doi: 10.1016/j.rvsc.2020.10.019 DOI: https://doi.org/10.1016/j.rvsc.2020.10.019
Asghari, A., Majidiani, H., Nemati, T., Fatollahzadeh, M., Shams, M., Naserifar, R., & Kordi, B. (2021). Toxoplasma gondii tyrosine-rich oocyst wall protein: A closer look through an in silico prism. Biomed Research International, 1(1), 1-13. doi: 10.1155/2021/1315618 DOI: https://doi.org/10.1155/2021/1315618
Attias, M., Teixeira, D. E., Benchimol, M., Vommaro, R. C., Crepaldi, P. H., & Souza, W. de. (2020). The life-cycle of Toxoplasma gondii reviewed using animations. Parasites & Vectors, 13(1), 1-13. doi: 10.1186/s13071-020-04445-z DOI: https://doi.org/10.1186/s13071-020-04445-z
Bushkin, G. G., Motari, E., Magnelli, P., Gubbels, M. J., Dubey, J. P., Miska, K. B., & Samuelson, J. (2012). β-1, 3-glucan, which can be targeted by drugs, forms a trabecular scaffold in the oocyst walls of Toxoplasma and Eimeria MBio, 3(5), 1-9. doi: 10.1128/mBio.00258-12 DOI: https://doi.org/10.1128/mBio.00258-12
Campos, D. R., Ouza, H. J. M., & Carrasco, L. P. S. (2015). Verminoses em gatos. Bayer Veterinary, 2(7), 1-8.
Davis, S. W., & Dubey, J. P. (1995). Mediation of immunity to Toxoplasma gondii oocyst shedding in cats. The Journal of Parasitology, 81(6), 882-886. doi: 10.2307/3284034 DOI: https://doi.org/10.2307/3284034
Dubey, J. P., Cerqueira-Cézar, C. K., Murata, F. H. A., Kwok, O. C. H., Yang, Y. R., & Su, C. (2020). All about toxoplasmosis in cats: the last decade. Veterinary Parasitology, 283, 109-145. doi: 10.1016/j.vetpar.2020.109145 DOI: https://doi.org/10.1016/j.vetpar.2020.109145
Dupont, D., Fricker-Hidalgo, H., Brenier-Pinchart, M. P., Garnaud, C., Wallon, M., & Pelloux, H. (2021). Serology for Toxoplasma in immunocompromised patients: still useful?. Trends in Parasitology, 37(3), 205-213. doi: 10.1016/j.pt.2020.09.006 DOI: https://doi.org/10.1016/j.pt.2020.09.006
Fritz, H. M., Bowyer, P. W., Bogyo, M., Conrad, P. A., & Boothroyd, J. C. (2012). Proteomic analysis of fractionated Toxoplasma oocysts reveals clues to their environmental resistance. PloS One, 7(1), e29955. doi: 10.1371/journal.pone.0029955 DOI: https://doi.org/10.1371/journal.pone.0029955
Hanafiah, M., Prastowo, J., Hartati, S., Aliza, D., & Nurcahyo, R. W. (2018). Detection of Toxoplasma gondii copro-prevalence by polymerase chain reaction using repetitive 529 bp gene in feces of pet cats (Felis catus) in Yogyakarta, Indonesia. Veterinary World, 11(9), 1338. doi: 10.14202/vetworld.2018.1338-1343 DOI: https://doi.org/10.14202/vetworld.2018.1338-1343
Herrmann, D. C., Maksimov, A., Pantchev, N., Globokar, M., Vrhovec, F. J. C., & Schares, G. (2011). Toxoplasma gondii oocysts in cat faeces. Ber Münch Woch, 124(11/12), 497-502. doi: 102376/0005-9366-124-497
Hoffman, W. A., Pons, J. A., & Janer, J. L. (1934). The sedimentation concentration method in schistosomiasis mansoni. The Puerto Rico Journal of Public Health and Tropical Medicine, 9, 283-291.
Hutchison, W. M., Dunachie, J. F., Siim, J. C., & Work, K. (1969). Life cycle of Toxoplasma gondii. British Medical Journal, 4(5686), 806. doi: 10.1136/bmj.4.5686.806-b DOI: https://doi.org/10.1136/bmj.4.5686.806-b
Igreja, J. A. S. L. D., Rezende, H. H. A., Melo, J. D. O., Garcia, J. L., Martins, F. D. C., & Castro, A. M. D. (2021). Copro-PCR in the detection and confirmation of Toxoplasma gondii oocysts in feces of stray and domiciled cats. Revista Brasileira de Parasitologia Veterinária, 30(2), e000621. doi: 10.1590/S1984-29612021022 DOI: https://doi.org/10.1590/s1984-29612021022
Karakavuk, M., Can, H., Karakavuk, T., Gül, A., Alak, S. E., Gül, C., & Döşkaya, A. D. (2022). Rapid detection of Toxoplasma gondii DNA in cat feces using colorimetric loop-mediated isothermal amplification (LAMP) assays targeting RE and B1 genes. Comparative Immunology, Microbiology and Infectious Diseases, 81, 101745. doi: 10.1016/j.cimid.2022.101745 DOI: https://doi.org/10.1016/j.cimid.2022.101745
Karakavuk, M., Can, H., Selim, N., Yeşilsiraz, B., Atlı, E., Şahar, E. A., Demir, F., Gul, A., Ozdemir, H. G., Alan, N., Yalçin, M., Ozkurt, O., Aras, M., Çelik, T., Can, S., Döşkaya, A. D., Guruz, A. Y., Döşkaya, M. (2021). Investigation of the role of stray cats for transmission of toxoplasmosis to humans and animals living in İzmir, Turkey. Journal of Infection Developing Countries, 15(1), 155-162. doi: 10.3855/jidc.13932 DOI: https://doi.org/10.3855/jidc.13932
Lutz, A. O. O. (1919). Schistosoma mansoni e a schistosomatose segundo observações, feitas no Brazil. Mem Inst Oswaldo Cruz, 11(1), 121-155. doi: 10.1590/S0074-02761919000100006 DOI: https://doi.org/10.1590/S0074-02761919000100006
Majid, A., Ahmad, N., Haleem, S., Zareen, S., Taib, M., Khan, S., & Hussain, R. (2021). Detection of toxoplasmosis in pets and stray cats through molecular and serological techniques in Khyber Pakhtunkhwa, Pakistan. BMC Veterinary Research, 17(1), 1-7. doi: 10.1186/s12917-021-03064-9 DOI: https://doi.org/10.1186/s12917-021-03064-9
Mancianti, F., Nardoni, S., Ariti, G., Parlanti, D., Giuliani, G., & Papini, R. A. (2010). Cross-sectional survey of Toxoplasma gondii infection in colony cats from urban Florence (Italy). Journal of Feline Medicine and Surgery, 12, 351-354. doi: 10.1016/j.jfms.2009.09.001 DOI: https://doi.org/10.1016/j.jfms.2009.09.001
Mitsui, K., Sato, S., & Kakuma, Y. (2020). Effects of the community cats program on population control, migration and welfare status of free-roaming cats in Tokyo, Japan. Animals, 10(3), 461-473. doi: 10.3390/ani10030461 DOI: https://doi.org/10.3390/ani10030461
Miura, A. C., Barros, L. D., Minutti, A. F., Martins, T. A., Sasse, J. P., & Nino, B. S. L. (2021). Evaluation of quantitative polymerase chain reaction for the detection of Toxoplasma gondii oocysts shed by cats. Brazilian Journal of Parasitology Veterinary, 30(4), e016621. doi: 10.1590/S1984-29612021091 DOI: https://doi.org/10.1590/s1984-29612021091
Montoya, A., Miro, G., Mateo, M., Ramírez, C., & Fuentes, I. (2009). Detection of Toxoplasma gondii in cats by comparing bioassay in mice and polymerase chain reaction (PCR). Veterinary Parasitology, 160(1-2), 159-162. doi: 10.1016/j.vetpar.2008.10.029 DOI: https://doi.org/10.1016/j.vetpar.2008.10.029
Nasiru Wana, M., Mohd Moklas, M. A., Watanabe, M., Zasmy Unyah, N., Alhassan Abdullahi, S., Ahmad Issa Alapid, A., & Abd Majid, R. (2020). Molecular detection and genetic diversity of Toxoplasma gondii oocysts in cat faeces from Klang Valley, Malaysia, using B1 and REP genes in 2018. Pathogens, 9(7), 576. doi: 10.3390/pathogens9070576 DOI: https://doi.org/10.3390/pathogens9070576
Portilho, M. B. F., & Carvalho, A. V. de. (2019). A toxoplasmose em felinos: parasitologia, imunologia e diagnóstico animal. Ag Liber, 1(1), 1-11. doi: 10.6008/CBPC2674-6476.2019.001.0001 DOI: https://doi.org/10.6008/CBPC2674-6476.2019.001.0001
Poulle, M. L., Forin-Wiart, M. A., Josse-Dupuis, É., Villena, I., & Aubert, D. (2016). Detection of Toxoplasma gondii DNA by qPCR in the feces of a cat that recently ingested infected prey does not necessarily imply oocyst shedding. Parasite, 23(29), 1-4. doi: 10.1051%2Fparasite%2F2016029 DOI: https://doi.org/10.1051/parasite/2016029
Rezende, H. H. A., Avelar, J. B., Storchilo, H. R., Vinaud, M. C., & Castro, A. M. D. (2015). Evaluation of the accuracy of parasitological techniques for the diagnosis of intestinal parasites in cats. Revista Brasileira de Parasitologia Veterinária, 24(4), 471-474. doi: 10.1590/S1984-29612018004 DOI: https://doi.org/10.1590/S1984-29612015069
Salant, H., Markovics, A., Spira, D. T., & Hamburger, J. (2007). The development of a molecular approach for coprodiagnosis of Toxoplasma gondii. Veterinary Parasitology, 146(3-4), 214-220. doi: 10.1016/j.vetpar.2007.02.022 DOI: https://doi.org/10.1016/j.vetpar.2007.02.022
Schares, G., Vrhovec, M. G., Pantchev, N., Herrmann, D. C., & Conraths, F. J. (2008). Occurrence of Toxoplasma gondii and Hammondia hammondi oocysts in the faeces of cats from Germany and other European countries. Veterinary Parasitology, 152(1-2), 34-45. doi: 10.1016/j.vetpar.2007.12.004 DOI: https://doi.org/10.1016/j.vetpar.2007.12.004
Shapiro, K., Bahia-Oliveira, L., Dixon, B., Dumètre, A., Wit, L. A. de, VanWormer, E., & Villena, I. (2019). Environmental transmission of Toxoplasma gondii: Oocysts in water, soil and food. Food and Waterborne Parasitology, 1(15) e00049. doi: 10.1016/j.fawpar.2019.e00049 DOI: https://doi.org/10.1016/j.fawpar.2019.e00049
Smith, N. C., Goulart, C., Hayward, J. A., Kupz, A., Miller, C. M., & van Dooren, G. G. (2021). Control of human toxoplasmosis. International Journal for Parasitology, 51(2-3), 95-121. doi: 10.1016/j.ijpara.2020.11.001 DOI: https://doi.org/10.1016/j.ijpara.2020.11.001
Veronesi, F., Santoro, A., Milardi, G. L., Diaferia, M., Morganti, G., Ranucci, D., & Gabrielli, S. (2017). Detection of Toxoplasma gondii in faeces of privately owned cats using two PCR assays targeting the B1 gene and the 529-bp repetitive element. Parasitology Research, 116(3), 1063-1069. doi: 10.1007/s00436-017-5388-z DOI: https://doi.org/10.1007/s00436-017-5388-z
Vitale, K. R. (2022). The social lives of free-ranging cats. Animals, 12(1), 126. doi: 10.3390/ani12010126 DOI: https://doi.org/10.3390/ani12010126
Wehbe, K., Pencole, L., Lhuaire, M., Sibiude, J., Mandelbrot, L., Villena, I., & Picone, O. (2022). Hygiene measures as primary prevention of toxoplasmosis during pregnancy: a systematic review. Journal of Gynecology Obstetrics and Human Reproduction, 51(3), 102300. doi: 10.1016/j.jogoh.2021.102300 DOI: https://doi.org/10.1016/j.jogoh.2021.102300
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