FISH e GISH revelam diferentes eventos de hibridização interespecífica entre Cuscuta denticulata e C. nevadensis (Convolvulaceae)

Abstract

Eventos de hibridização interespecífica são importantes na evolução de diversas famílias de angiospermas. No gênero Cuscuta (Convolvulaceae), seção Denticulata, há apenas três espécies, duas diploides: C. denticulata Engelm. e C. nevadensis I.M. Johnst., ambas com 2n = 30) e uma tetraploide (C. veatchii Brandegee, 2n = 60).  Recentemente, foi encontrada uma outra espécie tetraploide, denominada provisoriamente de C. psorothamnensis (2n = 60). Estudos moleculares sugerem que tanto C. veatchii quanto C. psorothamnensis teriam se originado de hibridização interespecífica entre C. denticulata e C. nevadensis. Para testar citologicamente essa hipótese foi realizada hibridização in situ fluorescente com sondas genômicas (GISH) dos dois supostos ancestrais diploides e com sondas de DNA ribossomal 5S e 35S (FISH) para identificar o número e posição desses sítios. A análise de GISH em C. veatchii revelou 30 cromossomos marcados mais fortemente com o DNA de C. denticulata, enquanto os 30 cromossomos restantes marcaram mais fortemente com a sonda genômica de C. nevadensis. Em C. psorothamnensis, pouco menos de 30 cromossomos marcaram com o DNA de C. denticulata ou com o DNA de C. nevadensis e alguns cromossomos pareceram não marcar com nenhuma das duas sondas. A FISH com DNAr revelou os seguintes números de sítios: C. denticulata, 2 (5S) + 2 (35S); C. nevadensis, 6 5S + 10 35S; C. veatchii, 6 (5S) + 4 (35S); C. psorothamnensis, 4 (5S) + 4 (35S). Variação no número de sítios de DNAr foi encontrada em todas as populações, exceto naquelas de C. denticulata. Os dados de GISH suportam a hipótese de que tanto C. veatchii quanto C. psorothamnensis são alopoliploides derivados de C. denticulata e C. nevadensis. Por outro lado, a análise de sítios de DNAr sugerem que dois ou mais eventos de hibridização interespecífica podem ter ocorrido entre C. denticulata e C. nevadensis.