Influência das condições de incubação nos meios de cultura para otimizar o primo isolamento de Mycobacterium bovis

Autores

  • Cássia Yumi Ikuta Universidade de São Paulo
  • Flávia Morato Universidade de São Paulo
  • Gisele Oliveira de Souza Universidade de São Paulo
  • Marcos Bryan Heinemann Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia
  • Marcos Amaku Faculdade de Medicina
  • José Soares Ferreira Neto Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia

DOI:

https://doi.org/10.5433/1679-0359.2016v37n5Supl2p3693

Palavras-chave:

Primo isolamento, Tuberculose bovina, Mycobacterium bovis, Meios de cultura, Condições de incubação.

Resumo

O isolamento do Mycobacterium bovis é fundamental para um sistema de vigilância para tuberculose bovina baseado na detecção de lesões em abatedouro. Assim, quatro meios de cultura sólidos e três condições de incubação foram investigados para elucidar qual combinação supera as outras através da avaliação de crescimento, tempo para o aparecimento da primeira colônia e número de colônias. Noventa e sete amostras de lesões granulomatosas foram submetidas ao processo de descontaminação por cloreto de 1-hexadecilpiridínio a 0,75%, e inoculadas em dois meios a base de ovo, Stonebrink (ST) e Löwenstein-Jensen com piruvato de sódio (LJp), e dois meios a base de ágar, ágar sangue tuberculose (B83) e Middlebrook 7H11 (7H11). Cada meio foi incubado a 37°C por 90 dias, em três condições de incubação: em atmosfera normal, em atmosfera com acréscimo de 10% de dióxido de carbono (CO2), e em atmosfera normal em tubos fechados com algodão hidrófobo queimado e subsequentemente fechado com rolha para criar uma atmosfera microaerófila. As colônias apareceram mais rapidamente e em maior número quando incubadas em atmosfera com 10% de CO2 (p < 0,01), independente dos meios. As micobactérias cresceram em maior abundância e mais rapidamente no meio B83 aos 30 dias de incubação, comparado a ST (0,0178), LJp (p < 0,0001) e 7H11 (p < 0,0001), apesar de não ter havido diferença entre B83, ST e LJp aos 60 e 90 dias de incubação. 7H11 exibiu o número mais baixo de isolados (p < 0,0001) e um período mais longo para o aparecimento da primeira colônia (p < 0,001). De acordo com nossos resultados, o uso concomitante dos meios ST e B83, incubados em atmosfera com acréscimo de 10% de CO2, aumenta a proporção de isolados e o número de UFC de M. bovis, além de abreviar o tempo para aparecimento das primeiras colônias, melhorando o diagnóstico direto de tuberculose.

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Biografia do Autor

Cássia Yumi Ikuta, Universidade de São Paulo

Pesquisador, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, USP, São Paulo, SP, Brasil.

Flávia Morato, Universidade de São Paulo

Pesquisador, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, USP, São Paulo, SP, Brasil.

Gisele Oliveira de Souza, Universidade de São Paulo

Pesquisador, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, USP, São Paulo, SP, Brasil.

Marcos Bryan Heinemann, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia

Prof., Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, USP, São Paulo, SP, Brasil.

Marcos Amaku, Faculdade de Medicina

Prof., Faculdade de Medicina, USP, São Paulo, SP, Brasil.

José Soares Ferreira Neto, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia

Prof., Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, USP, São Paulo, SP, Brasil.

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Publicado

2016-11-09

Como Citar

Ikuta, C. Y., Morato, F., Souza, G. O. de, Heinemann, M. B., Amaku, M., & Ferreira Neto, J. S. (2016). Influência das condições de incubação nos meios de cultura para otimizar o primo isolamento de Mycobacterium bovis. Semina: Ciências Agrárias, 37(5Supl2), 3693–3700. https://doi.org/10.5433/1679-0359.2016v37n5Supl2p3693

Edição

Seção

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