EXPRESSÃO, PRODUÇÃO E PURIFICAÇÃO DA PROTEÍNA NS1 PARA USO EM KIT DIAGNÓSTICO RÁPIDO PARA DENGUE.

Abstract

O diagnóstico de dengue vírus é atualmente realizado utilizando como antígeno viral a proteína NS1, esta, importante no processo de infecção do vírus. Técnicas de clonagem molecular são usadas a fim de expressar a NS1 de forma heteróloga em bactérias. As sequências gênicas desta proteína dos quatro sorotipos de dengue vírus foram analisadas e o consenso entre elas utilizado para a construção de um gene sintético (p70). Este foi ligado ao vetor de expressão pQE-32 e transformado em uma E. coli modificada (XL1-Blue), sendo posteriormente, a expressão do gene induzida com IPTG, e a análise da expressão feita por Western Blotting. O êxito da ligação do gene p70 ao vetor pQE-32 e posterior transformação em bactérias E. coli cepas XL1Blue, foi comprovado através da expressão da proteína recombinante de NS1 e esta pode ser utilizada como insumo para testes rápido para diagnóstico de dengue.